淺析β干擾素（IFN-β）LISA試劑盒的標(biāo)本要求及原理

　　β干擾素(IFN-β)是一種多肽，通常由成纖維細(xì)胞產(chǎn)生，具有抗病毒和抗增殖的作用。IFN-β與它的受體結(jié)合，誘導(dǎo)出復(fù)雜的轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。在免疫細(xì)胞中(IFN-β在多發(fā)性硬化癥中最可能的治療效果的目標(biāo))，IFN-β減少抗原呈遞和T細(xì)胞增殖，改變細(xì)胞因子和基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)表達(dá)，并恢復(fù)抑制功能。IFN-β的治療形式可以在細(xì)菌表達(dá)系統(tǒng)(IFN-beta1b)或哺乳動(dòng)物細(xì)胞(IFN-beta1a)中產(chǎn)生。
 

　　β干擾素(IFN-β)ELISA試劑盒的標(biāo)本要求：
 

　　1、標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
 

　　2、不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
 

　　β干擾素(IFN-β)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)原理：
 

　　本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人β干擾素(IFN-β)水平。用純化的人β干擾素(IFN-β)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入β干擾素(IFN-β)，再與HRP標(biāo)記的β干擾素(IFN-β)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的β干擾素(IFN-β)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值)，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人β干擾素(IFN-β)濃度。